在腫瘤學(xué)、免疫腫瘤學(xué)及抗腫瘤藥物篩選研究中，選擇合適的小鼠同源腫瘤模型至關(guān)重要。4T1 （小鼠乳腺癌細胞）是一種源自BALB/c小鼠自發(fā)性高轉(zhuǎn)移性乳腺腺癌的上皮樣細胞系，因其能在沒有免疫抑制的前提下在同源BALB/c小鼠體內(nèi)形成原發(fā)性腫瘤并自發(fā)轉(zhuǎn)移至肺、肝、骨和淋巴結(jié)，且對抗人HER2單抗等人類靶點藥物不敏感（避免交叉反應(yīng)干擾），被廣泛用作人三陰性乳腺癌（TNBC）的同源移植模型，是評估化療藥、免疫檢查點抑制劑（抗PD-1/PD-L1、抗CTLA-4）及CAR-T/CAR-NK療法效果的金標準細胞系之一。
 

　　細胞生物學(xué)特征

　　4T1細胞呈典型的上皮樣鋪展形態(tài)，貼壁生長，形成致密單層后可形成局部堆疊與集落。其主要特征包括：

　　激素受體狀態(tài)：ER（雌激素受體）陰性、PR（孕激素受體）陰性、HER2低/不表達——模擬人三陰性乳腺癌表型。

　　高轉(zhuǎn)移性：靜脈注入可形成肺轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)；原位（第4對乳腺脂肪墊）接種后腫瘤原發(fā)灶生長迅速，并自發(fā)經(jīng)血行轉(zhuǎn)移至肺（最常見）、肝臟、腎上腺、骨骼及引流淋巴結(jié)，轉(zhuǎn)移譜接近人乳腺癌晚期。

　　MHCI類分子表達正常，可在免疫健全BALB/c小鼠中引發(fā)T細胞應(yīng)答，故適合研究腫瘤免疫逃逸與免疫治療的體內(nèi)藥效。

　　可轉(zhuǎn)染，常用作構(gòu)建穩(wěn)定表達熒光蛋白（GFP、mCherry）或熒光素酶的報告細胞株，便于活體成像（IVIS）追蹤轉(zhuǎn)移灶。

　　體外培養(yǎng)條件

　　4T1細胞通常用含10%胎牛血清（FBS）及1%青霉素-鏈霉素雙抗的RPMI-1640或DMEM高糖培養(yǎng)基，在37℃、5%CO?濕潤培養(yǎng)箱中傳代。建議使用0.25%胰酶-EDTA消化，傳代比例1:3～1:6，避免過密匯合導(dǎo)致分化狀態(tài)改變。凍存保護劑多用含10%DMSO的培養(yǎng)基，液氮氣相保存。STR鑒定與支原體檢測是入庫與放行質(zhì)控要點。

　　主要應(yīng)用場景

　　抗腫瘤藥物體內(nèi)藥效評價：原位或皮下接種于6～8周齡雌性BALB/c小鼠，評估化療藥物（紫杉醇、阿霉素等）、小分子靶向藥及納米載藥系統(tǒng)的抑瘤率與轉(zhuǎn)移抑制效果。

　　腫瘤免疫學(xué)研究：配合免疫檢查（α-PD-1、α-CTLA-4）、TLR激動劑、腫瘤疫苗或過繼性T細胞治療，觀察CD8?T細胞浸潤、MDSC（髓源性抑制細胞）比例變化及細胞因子風(fēng)暴情況。

　　轉(zhuǎn)移機制研究：利用報告基因標記細胞，通過活體成像、組織切片免疫組化及流式細胞術(shù)追蹤循環(huán)腫瘤細胞（CTCs）與遠端器官定植過程，研究EMT（上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化）、侵襲相關(guān)基因表達。

　　藥物安全性與藥代動力學(xué)輔助模型：作為臨床前毒理批次的伴隨腫瘤模型動物。

　　4T1 （小鼠乳腺癌細胞）以其同源免疫背景下的高轉(zhuǎn)移特性和成熟的體內(nèi)建模方法，架起了基礎(chǔ)腫瘤生物學(xué)與免疫腫瘤學(xué)臨床前驗證之間的橋梁，是乳腺癌研究領(lǐng)域使用廣泛的鼠源腫瘤模型之一。