在腫瘤學、免疫腫瘤學及抗腫瘤藥物篩選研究中，選擇合適的小鼠同源腫瘤模型至關重要。4T1 （小鼠乳腺癌細胞）是一種源自BALB/c小鼠自發性高轉移性乳腺腺癌的上皮樣細胞系，因其能在沒有免疫抑制的前提下在同源BALB/c小鼠體內形成原發性腫瘤并自發轉移至肺、肝、骨和淋巴結，且對抗人HER2單抗等人類靶點藥物不敏感（避免交叉反應干擾），被廣泛用作人三陰性乳腺癌（TNBC）的同源移植模型，是評估化療藥、免疫檢查點抑制劑（抗PD-1/PD-L1、抗CTLA-4）及CAR-T/CAR-NK療法效果的金標準細胞系之一。
 

　　細胞生物學特征

　　4T1細胞呈典型的上皮樣鋪展形態，貼壁生長，形成致密單層后可形成局部堆疊與集落。其主要特征包括：

　　激素受體狀態：ER（雌激素受體）陰性、PR（孕激素受體）陰性、HER2低/不表達——模擬人三陰性乳腺癌表型。

　　高轉移性：靜脈注入可形成肺轉移結節；原位（第4對乳腺脂肪墊）接種后腫瘤原發灶生長迅速，并自發經血行轉移至肺（最常見）、肝臟、腎上腺、骨骼及引流淋巴結，轉移譜接近人乳腺癌晚期。

　　MHCI類分子表達正常，可在免疫健全BALB/c小鼠中引發T細胞應答，故適合研究腫瘤免疫逃逸與免疫治療的體內藥效。

　　可轉染，常用作構建穩定表達熒光蛋白（GFP、mCherry）或熒光素酶的報告細胞株，便于活體成像（IVIS）追蹤轉移灶。

　　體外培養條件

　　4T1細胞通常用含10%胎牛血清（FBS）及1%青霉素-鏈霉素雙抗的RPMI-1640或DMEM高糖培養基，在37℃、5%CO?濕潤培養箱中傳代。建議使用0.25%胰酶-EDTA消化，傳代比例1:3～1:6，避免過密匯合導致分化狀態改變。凍存保護劑多用含10%DMSO的培養基，液氮氣相保存。STR鑒定與支原體檢測是入庫與放行質控要點。

　　主要應用場景

　　抗腫瘤藥物體內藥效評價：原位或皮下接種于6～8周齡雌性BALB/c小鼠，評估化療藥物（紫杉醇、阿霉素等）、小分子靶向藥及納米載藥系統的抑瘤率與轉移抑制效果。

　　腫瘤免疫學研究：配合免疫檢查（α-PD-1、α-CTLA-4）、TLR激動劑、腫瘤疫苗或過繼性T細胞治療，觀察CD8?T細胞浸潤、MDSC（髓源性抑制細胞）比例變化及細胞因子風暴情況。

　　轉移機制研究：利用報告基因標記細胞，通過活體成像、組織切片免疫組化及流式細胞術追蹤循環腫瘤細胞（CTCs）與遠端器官定植過程，研究EMT（上皮-間質轉化）、侵襲相關基因表達。

　　藥物安全性與藥代動力學輔助模型：作為臨床前毒理批次的伴隨腫瘤模型動物。

　　4T1 （小鼠乳腺癌細胞）以其同源免疫背景下的高轉移特性和成熟的體內建模方法，架起了基礎腫瘤生物學與免疫腫瘤學臨床前驗證之間的橋梁，是乳腺癌研究領域使用廣泛的鼠源腫瘤模型之一。