在血管生物學研究和藥物開發(fā)領域，尋找一個既保持內(nèi)皮細胞特性又能穩(wěn)定傳代的細胞模型一直是科研人員面臨的挑戰(zhàn)。今天，我們將介紹一款在國內(nèi)自主研發(fā)的SV40T轉(zhuǎn)化人臍靜脈內(nèi)皮細胞系——普諾賽PUMC-HUVEC-T1（SV40T轉(zhuǎn)化人臍靜脈內(nèi)皮細胞）(STR鑒定正確)，它可能成為你血管相關研究的理想工具。

背景介紹

血管內(nèi)皮細胞是覆蓋在血管內(nèi)表面的單層細胞，在維持血管穩(wěn)態(tài)、調(diào)節(jié)血管張力、控制物質(zhì)交換以及參與炎癥反應和血管生成等過程中發(fā)揮著關鍵作用。長期以來，科研人員主要依靠原代人臍靜脈內(nèi)皮細胞（HUVEC）進行血管生物學研究，但原代細胞存在傳代次數(shù)有限、難以滿足長期實驗需求的局限性。

更為棘手的是，曾廣泛使用的“人臍靜脈內(nèi)皮細胞"ECV-304，經(jīng)STR檢測分析證明實際為膀胱癌細胞T24所污染，已不能作為血管內(nèi)皮的模型進行有關心血管生理、生化、疾病及藥物的研究。

為解決這一難題，中國醫(yī)學科學院基礎醫(yī)學研究所細胞資源中心通過感染SV40的大T和小T抗原，建立了可體外連續(xù)傳代的人臍靜脈內(nèi)皮細胞系PUMC-HUVEC-T1。

產(chǎn)品介紹

生長特性與細胞形態(tài)

PUMC-HUVEC-T1表現(xiàn)出典型的內(nèi)皮細胞樣形態(tài)，細胞呈扁平多角狀，匯合時呈現(xiàn)典型的鵝卵石樣排列。該細胞為貼壁生長類型，已證明在體外可傳至40代以上，傳代比例推薦為1：3～1：4。

培養(yǎng)方案

PUMC-HUVEC-T1的推薦培養(yǎng)條件為：使用DMEM高糖培養(yǎng)基（含4.5g/L葡萄糖） supplemented with 10%胎牛血清（FBS）和1%非必需氨基酸（NEAA）。培養(yǎng)環(huán)境為37℃、5% CO?、95%空氣的培養(yǎng)箱。傳代頻率建議為一周1～2次，使用0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液消化1-2分鐘。

凍存條件可使用基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS或90%FBS+10%DMSO的凍存液，長期保存應置于液氮中。

組織來源與細胞類型

PUMC-HUVEC-T1來源于人臍帶臍靜脈血管內(nèi)皮組織，種屬為人源性，性別為女性（XX染色體）。該細胞系屬于轉(zhuǎn)化細胞系，通過SV40 T抗原轉(zhuǎn)化獲得永生化特性，但保持了血管內(nèi)皮細胞的基本特性。

檢測原理

普諾賽PUMC-HUVEC-T1（SV40T轉(zhuǎn)化人臍靜脈內(nèi)皮細胞）鑒定采用了多種方法：

• 內(nèi)皮標記物檢測：免疫細胞化學檢測顯示，該細胞系內(nèi)皮標記vWF、CD31、CD34均呈陽性表達，并具有結(jié)合凝集素（如荊豆凝集素-1）的能力。

• 超微結(jié)構(gòu)分析：透射電鏡觀察可見細胞具有緊密連接和W-P小體（Weibel-Palade小體），這是內(nèi)皮細胞的典型超微結(jié)構(gòu)特征。

• 功能特性驗證：在Matrigel基質(zhì)膠上，PUMC-HUVEC-T1能夠形成管型結(jié)構(gòu)，模擬血管生成過程。

• 遺傳穩(wěn)定性評估：不同代數(shù)的PUMC-HUVEC-T1細胞核型保持正常穩(wěn)定（P12、P13、P19、P38），裸鼠體內(nèi)接種不成瘤（P9和P33），表明其不具有致瘤性。

• 身份鑒定：STR分析結(jié)果顯示PUMC-HUVEC-T1與原代HUVEC一致，種屬鑒定為人源性，且無支原體污染。

應用領域

普諾賽PUMC-HUVEC-T1（SV40T轉(zhuǎn)化人臍靜脈內(nèi)皮細胞）在多個研究領域具有廣泛應用前景：

• 血管生物學研究：用于研究血管生成、血管功能以及血管相關疾病如動脈粥樣硬化、高血壓等的病理機制。

• 藥物篩選與評價：在血管相關藥物篩選中應用廣泛，可評估藥物對血管內(nèi)皮細胞的影響，特別是在抗血管生成治療藥物的研發(fā)中。

• 基因功能研究：利用該細胞系進行血管相關基因的表達與功能驗證，評估特定基因?qū)ρ苌傻淖饔?/span>。

• 細胞遷移與血管生成實驗：通過劃痕實驗或Transwell實驗研究內(nèi)皮細胞的遷移能力，分析藥物或基因突變對遷移的影響。

• 內(nèi)皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EndMT）研究：有研究使用PUMC-HUVEC-T1細胞探索CXCL8如何通過CXCR2促進內(nèi)皮細胞發(fā)生EndMT。

產(chǎn)品優(yōu)勢

普諾賽PUMC-HUVEC-T1（SV40T轉(zhuǎn)化人臍靜脈內(nèi)皮細胞）具有多方面優(yōu)勢：

• 可靠的來源與背景：作為國內(nèi)自主研發(fā)的細胞系，PUMC-HUVEC-T1背景清晰，經(jīng)過嚴格的質(zhì)量控制，包括STR鑒定、支原體檢測和種屬鑒定等。

• 保持內(nèi)皮細胞特性：盡管經(jīng)過SV40 T抗原轉(zhuǎn)化，該細胞系仍保留了內(nèi)皮細胞的基本特性，包括形態(tài)、標記物表達和功能特性。

• 穩(wěn)定的傳代能力：相比原代HUVEC，PUMC-HUVEC-T1具有更強的增殖能力和更長的傳代壽命，可滿足長期實驗需求。

• 替代污染細胞系的理想選擇：與ECV-304等已被證明污染的細胞系相比，PUMC-HUVEC-T1具有更高的可靠性和應用價值。

• 已獲多項科研項目支持：截至2014年9月，PUMC-HUVEC-T1已支持包括863、973和國家重大專項4項，國家自然科學基金24項在內(nèi)的多項科研項目。

文獻引用

PUMC-HUVEC-T1細胞系已被多項研究引用，以下是部分代表性文獻：

1. 馮海涼， 王春景， 顧蓓， 等. 猿猴病毒40 T抗原轉(zhuǎn)化的人臍靜脈內(nèi)皮細胞系PUMC-HUVEC-T1的建立[J]. 解剖學報， 2013, 44(2): 199-203. 

2. 一項發(fā)表于《Molecular and Cellular Biochemistry》(2023)的研究，使用PUMC-HUVEC-T1細胞探索缺氧預處理的骨髓間充質(zhì)干細胞來源的細胞外囊泡通過遞送miR-34c改善下肢缺血的作用機制。該期刊影響因子為4.3。

3. 一項發(fā)表于《Pharmaceuticals》(2023)的研究，使用PUMC-HUVEC-T1細胞研究CXCL8通過CXCR2促進內(nèi)皮細胞發(fā)生內(nèi)皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EndMT)的機制。

總結(jié)

普諾賽PUMC-HUVEC-T1（SV40T轉(zhuǎn)化人臍靜脈內(nèi)皮細胞）作為一款國內(nèi)自主研發(fā)的SV40T轉(zhuǎn)化人臍靜脈內(nèi)皮細胞系，既克服了原代HUVEC傳代有限的缺點，又保持了血管內(nèi)皮細胞的基本特性。與已被污染的ECV-304等細胞系相比，它具有更高的可靠性和應用價值。隨著血管生物學和心血管疾病研究的不斷深入，PUMC-HUVEC-T1有望成為內(nèi)皮細胞研究領域的重要工具，為血管相關疾病的機制探索和藥物研發(fā)提供有力支持。