DMEM培養基是細胞培養領域應用廣泛的基礎營養液。
DMEM培養基使用時需重點關注以下核心注意事項:
一、無菌操作規范
所有接觸培養基的器具需嚴格滅菌,全程在超凈工作臺內操作。
操作前用75%乙醇擦拭雙手和臺面,避免說話、咳嗽,防止微生物污染。
二、儲存條件管控
未開封干粉培養基需存放在干燥陰涼處,避光防潮。
配制好的液體培養基2-8℃冷藏,禁止冷凍,完全培養基建議4周內用完。
含L-谷氨酰胺的培養基不宜長期存放,使用前可按需補加該成分。
三、使用前狀態核查
從冰箱取出后先平衡至室溫,避免低溫刺激細胞。
觀察培養基顏色,正常為淡紅色,變黃提示pH下降,變紫提示pH升高,渾濁/有絮狀物說明已污染,需立即停用。
四、培養過程要點
接種密度需匹配細胞生長特性,細胞長至培養容器80%-90%時及時傳代,避免營養耗盡。
盡量不頻繁更換培養基品牌/批次,如需更換需提前做預實驗,觀察細胞適應情況。
培養箱需維持37℃、5% CO?環境,保障培養基緩沖體系穩定,維持pH在7.2-7.4適宜區間。