DMEM培養(yǎng)基是細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域應(yīng)用廣泛的基礎(chǔ)營養(yǎng)液。
DMEM培養(yǎng)基使用時需重點(diǎn)關(guān)注以下核心注意事項:
一、無菌操作規(guī)范
所有接觸培養(yǎng)基的器具需嚴(yán)格滅菌,全程在超凈工作臺內(nèi)操作。
操作前用75%乙醇擦拭雙手和臺面,避免說話、咳嗽,防止微生物污染。
二、儲存條件管控
未開封干粉培養(yǎng)基需存放在干燥陰涼處,避光防潮。
配制好的液體培養(yǎng)基2-8℃冷藏,禁止冷凍,完全培養(yǎng)基建議4周內(nèi)用完。
含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基不宜長期存放,使用前可按需補(bǔ)加該成分。
三、使用前狀態(tài)核查
從冰箱取出后先平衡至室溫,避免低溫刺激細(xì)胞。
觀察培養(yǎng)基顏色,正常為淡紅色,變黃提示pH下降,變紫提示pH升高,渾濁/有絮狀物說明已污染,需立即停用。
四、培養(yǎng)過程要點(diǎn)
接種密度需匹配細(xì)胞生長特性,細(xì)胞長至培養(yǎng)容器80%-90%時及時傳代,避免營養(yǎng)耗盡。
盡量不頻繁更換培養(yǎng)基品牌/批次,如需更換需提前做預(yù)實驗,觀察細(xì)胞適應(yīng)情況。
培養(yǎng)箱需維持37℃、5% CO?環(huán)境,保障培養(yǎng)基緩沖體系穩(wěn)定,維持pH在7.2-7.4適宜區(qū)間。